cyclosporine A, HPLC, HPLC-MS

Autoři se zabývají současnými metodicko-analytickými možnostmi terapeutického monitorování cyklosporinu A (CyA) u pacientů s transplantovanými orgány event. u pacientů s autoimunitním onemocněním. Standardní metodou stanovení CyA je dobře validovaná HPLC metoda, která umožňuje nejen stanovení parentní látky, ale i jeho hlavních metabolitů: AM1 (M17), AM9 (M1) a AM4N (M21). HPLC metody pro stanovení CyA vyžadují poměrně náročnou a pracnou přípravu vzorku krve, to je extrakci a čistění. Dělení se většinou provádí na kolonách C18 nebo kyano-kolonách izokratickou elucí za zvýšené teploty (70oC). Jako vnitřní standard se používá cyklosporin D (CyD) nebo cyklosporin C (CyC). HPLC-MS umožňuje jednoznačnou identifikaci metabolitů po rozdělení na chromatografické koloně a používá se především pro výzkumné účely.

Recent analytical possibilities of therapeutic drug monitoring (TDM) of cyclosporine A (CyA) both in solid organ transplanted patients and in patients with autoimmune diseases are described. Standard method for determination of CyA in blood is validated HPLC. There were developed HPLC methods, which enable determination of the parent drug, but also main metabolites of CyA: AM1 (M17), AM9 (M1), and AM4N (M21). Preparation of blood samples their extractions and cleanings are discussed. Chromatography is usually carried on C18 or CN columns by izocratic elution under high temperature (70 °C). Cyclosporine D (CyD) or cyclosporine C (CyC) is used as an internal standard. HPLC-MS method enables unambiguous identification of CyA metabolites after their separation on chromatographic column and is used mostly for research purposes only.